抗体制备-抗体制备的一般流程图

摘要： 本文目录一览：1、简述单克隆抗体的制备过程2、如何制备多克隆抗体...

本文目录一览：

• 1、简述单克隆抗体的制备过程
• 2、如何制备多克隆抗体
• 3、简述单克隆抗体的制备过程及原理。
• 4、如何自己制备抗体?如何检测抗体的纯度?

简述单克隆抗体的制备过程

杂交瘤阳性克隆的筛选与克隆化：在HAT培养基中生长的杂交瘤细胞，只有少数是分泌预定特异性单克隆抗体的细胞，因此，必须进行筛选和克隆化。通常用有限稀释法进行杂交瘤细胞的克隆化培养。

④将选择细胞进行规模培养或注射到小鼠腹腔内增殖(活体培养基)；⑤从细胞培养液或小鼠腹水中提取大量的单克隆抗体。单克隆抗体技术的重大意义在于可以用不纯的抗原分子制备特异性强、纯度高、均一性好的单克隆抗体。

进行体内或体外培养。体内培养就是将杂交瘤细胞注入实验动物腹腔，将来从腹水中提取。

单克隆抗体的制备过程中，首先要给实验动物注射抗原，以获取相应的B淋巴细胞。将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，再用特定的选择性培养基进行筛选，以获得杂交瘤细胞。

）抗体：一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。从血清中分离出的抗体产量低、纯度低、特异性差。

（一）脾细胞 1．材料 (1)免疫过的血清抗体滴度高的Balb/c鼠。 (2)1640培养液 单克隆抗体制备流程 (3)5％FCS－1640营养液 2．操作方法 (1)拉颈或用CO2处死小白鼠。

如何制备多克隆抗体

制备兔源多克隆抗体的主要步骤包括： 准备完全抗原。 对兔子进行免疫。 进行效价检测和终放。 进行抗体亲和纯化。 对抗体进行浓缩和保存。在免疫过程中，需要选择合适的佐剂和抗原，以产生良好的免疫反应。

多克隆抗体的制备一般包括以下几个步骤：制备抗原。选择实验动物。动物免疫。试取血进行测试，看看是否成功免疫。如果成功免疫，杀死实验动物，集全部血清。纯化出抗体。鉴定抗体。包括纯度以及特异性。

（1）多克隆抗体的制备。①免疫方法：对多克隆抗体，免疫方法一般有皮下或肌肉免疫法、皮内免疫法、淋巴结免疫法和混合法等。

简述单克隆抗体的制备过程及原理。

单克隆抗体的制备过程中，首先要给实验动物注射抗原，以获取相应的B淋巴细胞。将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，再用特定的选择性培养基进行筛选，以获得杂交瘤细胞。

（1）显微操作法：在显微镜下取单细胞，然后进行单细胞培养。这种方法操作复杂，效率低，故不常用。

【答案】：单克隆抗体技术是15年英国科学家将产生抗体的淋巴细胞与肿瘤细胞融合建立起来的一项技术。是将能产生抗体的淋巴细胞和无限繁殖的肿瘤细胞，通过细胞融合获得既能产生抗体又能无限繁殖的细胞。

进行体内或体外培养。体内培养就是将杂交瘤细胞注入实验动物腹腔，将来从腹水中提取。

如何自己制备抗体?如何检测抗体的纯度?

1、测定纯度可以用交叉试验，就是用你制备的血清去和不同的抗原反应，看有没有结合能力，如果有非可以和其他抗原结合，可能你的抗原有污染，或者动物接触了其他的抗原。

2、多克隆抗体的制备一般包括以下几个步骤：制备抗原。选择实验动物。动物免疫。试取血进行测试，看看是否成功免疫。如果成功免疫，杀死实验动物，集全部血清。纯化出抗体。鉴定抗体。

3、准备完全抗原。 对兔子进行免疫。 进行效价检测和终放。 进行抗体亲和纯化。 对抗体进行浓缩和保存。在免疫过程中，需要选择合适的佐剂和抗原，以产生良好的免疫反应。

4、人工制备抗体是获得大量抗体的重要途径。制备方法有按常规动物免疫方法获得的多克隆抗体，用杂交瘤技术制备的单克隆抗体和近年来发展的基因工程抗体法。

5、取兔血有两种方法，一是耳缘静脉或耳动脉放血，一是颈动脉入血，也可心脏血。取动脉或静脉放血时，将兔放入一个特造的木匣或笼内，耳露于箱(笼)外，也可由另一人捉住兔身。